KIP-Veröffentlichungen

Jahr 2016
Autor(en) Emma Wagner
Titel Lokalisationsmikroskopische Analyse des Einflusses ionisierender Strahlung auf die Struktur von Heterochromatin und y-H2AX in HeLa-Zellen
KIP-Nummer HD-KIP 16-121
KIP-Gruppe(n) F18
Dokumentart Bachelorarbeit
Abstract (de)

In dieser Arbeit wird der Einfluss ionisierender Strahlung auf die Struktur von Heterochromatin und γ-H2AX in HeLa-Zellen untersucht. Dazu wurden γ-H2AX und Heterochromatin mit Fluoreszenzfarbsto en markiert und unter einem Lokalisationsmikroskop betrachtet, welches eine Auflöosung von bis zu 10 nm erreicht. Die betrachteten Zellen wurden unterschiedlich stark bestrahlt und zu verschiedenen Zeitpunkten nach der Bestrahlung fixiert, so dass sowohl der Einfluss der Bestrahlungsdosis als auch die zeitliche Entwicklung nach der Bestrahlung untersucht werden können.

γ-H2AX ist ein Reparaturprotein, welches DNA-Doppelstrangbruche markiert, indem es Focium sie bildet. Es wird gezeigt, dass sowohl die Anzahl als auch die Größe dieser Foci mit zunehmender Bestrahlungsdosis zunimmt. Auerdem stellt sich heraus, dass Anzahl und Größe der Foci eine halbe Stunde nach Bestrahlungsbeginn, was der früheste in dieser Arbeit untersuchte Fixierungszeitpunkt ist, am größten sind. Danach nehmen Anzahl und Größe der Foci ab, und acht Stunden nach der Bestrahlung liegt die Anzahl der Foci wieder auf dem Niveau von unbestrahlten Zellen.
Des Weiteren wird gezeigt, dass die Dichte von Heterochromatin innerhalb der γ-H2AX-Foci größer ist als außerhalb. Ein Zusammenhang mit Bestrahlungsdosis oder Fixierungszeitpunkt wird jedoch nicht beobachtet.

Abstract (en)

In this thesis, the influence of ionizing radiation on the structure of heterochromatine and γ-H2AX is examined. γ-H2AX and heterochromatine were marked with fluorescent dyes and observed under a localization microscope, which reaches a resolution of up to 10 nm. The examined cells were irradiated with different doses and fixated at different times after irradiation, so that the influuence of irradiation dose as well as the temporal development can be investigated.

γ-H2AX is a reparation protein, which marks DNA double strand breaks by forming foci around them. It is shown that number and size of these foci increase with higher irradiation doses. Moreover, it is determined that number and size were largest half an hour after irradiation, which is the earliest time of fixation examined in this thesis. Afterwards, both number and size of γ-H2AX foci decrease. Eight hours after irradiation, the number of foci is at the same level as in unirradiated cells.
Furthermore, it is shown that heterochromatine density is higher inside of γ-H2AX foci than outside. A correlation between this density and irradiation dose or time of fixation is not found.

KIP - Bibliothek
Im Neuenheimer Feld 227
Raum 3.402
69120 Heidelberg